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其林貝爾

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用其林貝爾XW-80A對大腸菌群的探討

返回列表 來源:未知 發布日期:2020-02-28 08:56【

糞大腸菌群與大腸菌群相似,主要以其檢出 情況來判斷食品是否受到糞便污染。糞便中既有 正常腸道菌,也可能有腸道致病菌(如沙門氏菌、 志賀氏菌、霍亂弧菌、副溶血弧菌等)。因此,食 品受到糞便污染就對食用者造成潛在的危害。通 常情況下,糞大腸菌群與大腸菌群相比,在人和 動物糞便中所占的比例較大,而且由于糞大腸菌 群在自然界容易死亡等原因,該菌群的存在可認 為食品直接或間接受到了近期的糞便污染。


1 材料與方法 


1.1 材料與設備 


1.1.1 實驗材料 


大腸埃希氏菌(Escherichia coli): ATCC25922,美國ATCC標準菌株庫;月桂基 硫酸鹽胰蛋白胨(LST)肉湯、EC肉湯培養基: 北京陸橋技術股份有限公司;無菌生理鹽水 (0.85%NaCl)、無菌1mol/L NaOH、無菌1mol/L HCl。 


1.1.2 儀器設備 


LRH-150恒溫培養箱:鄭州生元 儀器有限公司;SHA-C恒溫水浴箱:常州諾基儀 器有限公司;BXM-30R高壓蒸汽滅菌器:上海博 訊實業有限公司醫療設備廠;SW-CJ-2D超凈工作 臺:滬凈凈化公司;JY 5002電子天平:上海良平 儀器儀表有限公司;HN-08均質器:上海汗諾儀 器有限公司;XW-80A振蕩器:海門市其林貝爾儀器制造有限公司。 


1.2 檢測方法 


1.2.1 國標方法(GB 4789.39—2013) 


將25 g(mL) 檢樣加入225 mL稀釋液,均質,10倍系列稀釋, 選擇適宜3個連續稀釋度的樣品勻液,接種LST肉 湯管,每管接種1 mL(如接種量需要超過1 mL,則 用雙料LST肉湯),(36±1)℃培養24~48 h,產氣 管進行復發酵試驗,取培養物1環,移種于EC肉 湯管中,(44.5±0.2)℃水浴培養(24±2)h,計EC發 酵管陽性管數,查MPN表報告結果。 


1.2.2 改進方法


將25 g(mL)檢樣加入225 mL 稀釋液,均質,10倍系列稀釋,選擇適宜3個連續 稀釋度的樣品勻液,直接接種EC肉湯管,每管接 種1 mL(如接種量需要超過1 mL,則用雙料EC肉 湯),(44.5±0.2)℃水浴培養(24±2)h,計EC發酵 管陽性管數,查MPN表報告結果。


2 結果與討論


準備3份不同濃度大腸埃希氏菌(Escherichia coli)菌液,分別為低(0.36 MPN/mL)、中(9.3 MPN/ mL)、高(110 MPN/mL)3個濃度值,分別使用國標 方法和改進方法重復7次檢測糞大腸菌群。對20個實際瓜子樣品進行糞大腸 菌群檢測,國標方法與改進方法的陽性發酵管數 存在不一致情況;國標方法檢測瓜子中糞大腸菌 群陽性檢出率為45%,改進方法檢測瓜子中糞大 腸菌群陽性檢出率為40%;整體趨勢上,改進方 法測得結果略低于國標方法,但改進方法測得結 果均在國標方法95%置信區間內。


3 結論 


改進后檢測方法與當前國 標方法相比,改進方法檢測數值相關系數為 r=0.943,P=0.000,均在95%置信區間內,統計學 意義上無顯著區別。國標方法(GB 4789.39—2013) 分為LST肉湯初發酵和EC肉湯復發酵兩個過程, 操作步驟較復雜,工作量較大,干擾因素多,需 要經過48~72 h培養后才能得到測定結果,在進 行大批量瓜子樣品檢測時耗時較長[12-13] ;改進方 法是直接進行一步EC肉湯發酵過程,簡單、快 捷、經濟、高效,可在24 h內得到測定結果,可 用于實際瓜子樣品大批量時的檢測。





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