材料與方法
清潔級動物房; BS20S 電子天平( Sartorius 公 司) ; Thermo Scientific Forma 702 超低溫冰箱( 美國 賽默飛 世 爾 科 技 有 限 公 司) ; 高 壓 滅 菌 鍋 ( 日 本 Sanyo 公司) ; 5424R 高速冷凍離心機( Eppendorf 公 司) ; VDRTEX 5 渦旋混合器( 其林貝爾公司) ; DYY 6C 電泳儀( 北京六一儀器廠) 。質粒轉化大腸桿菌后獲得表達菌株( 由中國科 學院實驗海洋生物學重點實驗室構建和保藏) ,經 優化的發酵條件發酵,利用親和層析法分離純化得 到重組藻紅蛋白。SPF 級 昆 明 種 小 鼠,雄 性,共 計 72 只,體 重 ( 36 ± 2) g,鼠齡 4 ~ 5 周齡,北京維通利華實驗動物 中心,實驗動物許可證號: SYXK( 魯) 20150003。小 鼠肝癌細胞株 H22,由中國海洋大學藥物所藥理室 低溫凍存保種,復蘇后傳代的細胞懸液。
結 果
RPE 高、低 劑量組和陽性對照組的平均瘤重均低于模型組,其 中高劑量干預組和陽性對照組與模型組相比,有顯 著差異( P < 0. 05) ,說明 RPE 可以抑制小鼠腫瘤生 長,并且隨著劑量增加,抑制作用有增強的趨勢。從 抑瘤率來看,RPE 高、低劑量組雖有明顯的抑瘤作 用( 低: 21. 33% ,高: 38. 91% ) ,但與陽性對照組 ( 78. 24% ) 相比仍有較大差距; 但從對小鼠攝食及 活動等影響來看,RPE 組均較陽性藥物更能保持小 鼠的活力。模型組高達正常對照組的 5. 5 倍,說明腫瘤浸潤侵染組織,引發明顯的炎性 反應; 過量的 IL-12 可導致免疫損傷。RPE 高 劑量組比模型組降低了約 30% ,提示 RPE 可以有 效減輕炎癥反應帶來的淋巴細胞數目激增的免疫 防御效應,其機制可能是通過抑制 IL-12,TNF-α 和 INF-γ 的合成與分泌而阻滯炎癥過程,調節過度免 疫防御反應,平衡小鼠小鼠的機體免疫作用,顯示 抗腫瘤活性。
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